大鼠促黄体生成素(LH)ELISA试剂盒(S型)
发布时间:2024-12-30 点击数:96
大鼠促黄体生成素(LH)ELISA试剂盒(S型)
LBIS® Rat LH ELISA KIT(S type)
LH是在垂体前叶(腺垂体)嗜碱性促性腺激素生产细胞(脑垂体)中通过与FSH共同产生、贮存、在下丘脑激素LHRH的刺激下而分泌的。精巢中也含有这类物质。在动物种类方面分布在鱼类-哺乳类的全脊椎动物。在雄性大鼠垂体中LH含量为6~7 μg/gland,雌性为3~4 μg/gland(NIH-LH1 S1 换算)。雄性较多,雌性会根据性周期而变化。
LH是分子量约29000的糖蛋白,是由TSH、FSH共同的α-亚基以及LH特有的β-亚基组成的杂二聚体。
LH的目标器官,在雌性动物中是卵泡的成熟颗粒细胞,与FSH协同促进卵细胞成熟和雌性激素的生产,诱导排卵,促进排卵后黄体化孕甾酮生产分泌。在雄性动物中是精巢的间质细胞(睾丸间质细胞),促进其雄性激素分泌,与雄性激素作用促进2次精子形成有关。受体是膜7次贯通- G蛋白共轭型PKA。
因此,LH不足会导致性类固醇分泌降低,间质细胞萎缩,排卵黄体化停止等现象。过量状态下会导致精巢间质细胞肥大而且持续萎缩,雌激素、雄激素分泌增加,早熟过排,促性成熟等现象。
LH的分泌受GnRH (LHRH)直接促进,生理状态表现为血液中性类固醇低下(间接、直接),性周期变化(特别是排卵前期),更年期-闭经后分泌增加。
男性会随着年龄的增长而增加。发情前期大量分泌的雌激素通过正反馈,在LHRH作用下引起暂时性LH大量分泌(LH波动),诱发排卵。
血液中性类固醇的增加以及阿片肽特别是β-内啡肽,在幼儿期、妊娠期、产后期等会抑制LH的分泌。
◆特点
● 测定时间短(总反应时间:3小时50分钟)。
● 微量样本(标准操作法10 μL)即可测定。
● 使用无害的防腐剂。
● 全部试剂为溶液即用类型。
● 高测定精度和高重复性。
◆试剂盒组成
组成品 | 状态 | 包装 |
(A)抗体包被96孔板 | 清洗后使用 | 96 wells(8×12)/1个 |
(B)标准溶液(100 ng/mL) | 稀释后使用 | 200 μL/1瓶 |
(C)测定用缓冲液 | 直接使用 | 60 mL/1瓶 |
(D)生物素结合抗GH抗体 | 稀释后使用 | 100 μL/1瓶 |
(E)过氧化物酶·抗生素结合物 | 稀释后使用 | 100 μL/1瓶 |
(F)显色液(TMB) | 直接使用 | 12 mL/1瓶 |
(G)样本稀释用缓冲液 | 直接使用 | 12 mL/1瓶 |
(H)终止液(1M H2SO4) ※小心轻放 | 直接使用 | 12 mL/1瓶 |
(I)浓缩清洗液(10×) | 稀释后使用 | 100 mL/1瓶 |
孔板密封膜 | 4个 | |
产品说明书 | 1本 |
◆样本信息
● 大鼠血清·血浆
● 10 μL/well(标准操作法)
※ 样本需要用(G)样本稀释缓冲液稀释2倍,搅拌后室温下静置处理10分钟,再用(C)测定缓冲液稀释2.5倍,稀释液在测定中使用(最终稀释
率为5倍)。最终稀释倍数的极限是2.5倍。但是,需用缓冲液将板孔总量调制至 50 μL。
※ 推荐使用1 mg/mL(终浓度)EDTA-2Na作为抗凝剂,不可使用肝素Na血浆。
◆测定范围
0.313~10 ng/mL(标准曲线范围)
1.565~50 ng/mL(样本量10 μL时)
◆实验数据
精度测试(组内变异)
样本 | A | B |
1 | 8.74 | 1.15 |
2 | 8.78 | 1.03 |
3 | 8.79 | 1.07 |
4 | 8.68 | 1.06 |
5 | 8.03 | 1.03 |
6 | 8.27 | 1.13 |
7 | 7.94 | 1.07 |
8 | 7.97 | 1.05 |
Mean | 8.40 | 1.07 |
SD | 0.39 | 0.04 |
CV(%) | 4.6 | 3.9 |
单位:ng/mL,n=8
重复性测试(组间变异)
测定日/样本 | E | F | G |
0天 | 5.01 | 1.25 | 0.328 |
1天 | 5.01 | 1.24 | 0.329 |
2天 | 5.00 | 1.27 | 0.347 |
3天 | 5.00 | 1.28 | 0.337 |
Mean | 5.00 | 1.26 | 0.335 |
SD | 0.0019 | 0.016 | 0.0088 |
CV(%) | 0.038 | 1.3 | 2.6 |
单位:ng/mL,n=4
加标回收测试
样本C
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 1.29 | - | - |
0.584 | 1.89 | 0.601 | 103 |
1.17 | 2.48 | 1.19 | 102 |
1.75 | 3.01 | 1.73 | 98.5 |
单位:ng/mL,n=2
样本D
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 2.23 | - | - |
1.36 | 3.59 | 1.35 | 100 |
3.39 | 5.60 | 3.36 | 99.2 |
4.07 | 6.21 | 3.97 | 97.7 |
单位:pg/mL,n=2
稀释直线性测试
2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果,直线回归值 R2=0.999。
产品列表
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
630-23929 | (AKRLH-010S)大鼠促黄体生成素(LH)ELISA试剂盒(S型) LBIS® Rat LH ELISA KIT(S type) | 96 tests |