支原体清除试剂：解决细胞培养中支原体污染问题的利器

支原体（Mycoplasma）是较小的原核细胞型微生物，因其无细胞壁结构、形态多变和体型微小，其大小介于0.1至0.3微米之间，能够轻松通过滤菌设备。支原体可穿透孔径为0.22微米的除菌滤膜，这一特性使其成为细胞培养中难以彻底解决的污染源。截至目前，科学界已记录了超过100种支原体种类。

支原体清除是细胞培养中一个重要的步骤，因为支原体污染会严重影响细胞实验的可靠性和结果。首先，支原体能够干扰细胞的正常生理功能，影响细胞的生长、分裂和代谢过程，从而导致实验结果的不准确。其次，支原体污染还可能引发细胞凋亡或坏死，进一步影响实验数据的可靠性。此外，支原体还可能携带并传播其他病原体，增加实验过程中的风险。

针对支原体污染，支原体清除试剂提供了一种有效解决方案。该试剂包含两类主要药物：一种可抑制支原体蛋白质合成，另一种可阻断支原体DNA合成。通过连续7至14天的处理，该试剂能够彻底杀灭并清除支原体，其效果持久可靠。

经测试，该清除试剂对包括293T、HeLa、CHO-K1、LX2、SP2/0、ST、Vero、HA-VSMC、Jurkat及Min-6等在内的超过20种细胞系均表现出显著的支原体清除效果。同时，试剂对细胞的正常生理功能未产生明显负面影响，未观察到显著毒副作用，确保细胞培养的安全性与稳定性。

将支原体清除试剂I和II分装成小规格，置于4℃冰箱保存。如短期内未使用，剩余试剂需存放于-20℃冷冻以保持效果。使用时，按照1:100的体积比例，将试剂加入到完全培养基中。

以T25细胞培养瓶为例，接种50-100万个细胞，加入4-6 mL含支原体清除试剂的全新完全培养基。

每2-3天更换一次含支原体清除试剂的全新完全培养基。进行细胞传代时，需先离心，取适量细胞转移到新的T25细胞培养瓶中，并添加含支原体清除试剂的新鲜完全培养基。

经过7-10天处理后，使用支原体检测试剂盒检测支原体清除情况。如仍有残留，可继续处理1-2个周期后再检测。为确保彻底清除支原体，建议在1个月后进行复检，以排除潜在的污染风险。

支原体污染对生物工程 3D 肾囊肿形成能力的影响

-20 ℃保存，有效期3年。

不建议将高浓度的试剂I和II混合后保存，以免影响效果的稳定性。

1、 Teresa M DesRochers，et al. The effects of mycoplasma contamination upon the ability to form bioengineered 3D kidney cysts. PLoS One. 2015 Mar 20;10(3):e0120097.